■ 基本信息
別名: | pET-28a-EYFP |
啟動子: | T7 |
復制子: | pBR322 |
終止子: | T7 terminator |
質(zhì)粒分類: | 大腸系列質(zhì)粒;大腸熒光質(zhì)粒;大腸黃色質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 6064bp |
質(zhì)粒標簽: | N-6×His, N-Thrombin, N-T7,N-EYFP, C-6×His |
原核抗性: | Kan |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
表達宿主: | BL21(DE3)等大腸桿菌 |
誘導方式: | IPTG或乳糖及其類似物 |
5'測序引物: | T7(TAATACGACTCACTATAGGG) |
3'測序引物: | T7-ter(TGCTAGTTATTGCTCAGCGG) |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達 |
片段類型: | ORF
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片段物種: |
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原核抗性: | Kan |
真核抗性: |
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熒光標記: | 黃色
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■ 質(zhì)粒簡介
pET28a-EYFP質(zhì)粒是一種原核表達載體,C端含有一個6×His標簽,N端含有一個thrombin位點、6×His標簽、T7標簽和EYFP標簽。該質(zhì)粒含有多個常用的酶切位點,便于不同基因克隆。表達由宿主細胞提供的T7 RNA聚合酶誘導,目的基因被克隆到質(zhì)粒載體上,受噬菌體強轉(zhuǎn)錄及翻譯信號控制。
pET系統(tǒng)是有史以來在大腸桿菌中表達重組蛋白的功能最強大的系統(tǒng),也是現(xiàn)今原核表達方面使用最廣泛的系統(tǒng)。該系列質(zhì)粒能很容易的通過降低誘導物的濃度來削弱蛋白表達。在非誘導條件下,可以使目的基因處于完全沉默狀態(tài)而不轉(zhuǎn)錄。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請下載:
ZK1633 pET28a-EYFP大腸熒光質(zhì)粒.txt