產(chǎn)品介紹：
本公司生產(chǎn)的K1克隆感受態(tài)細(xì)胞源于優(yōu)選的Turbo菌株。該菌株是經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化，使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè)，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1×109cfu/μg DNA。K1克隆感受態(tài)細(xì)胞中突變的ΔlacZM15基因產(chǎn)物與載體攜帶的β-半乳糖苷酶基因表達(dá)產(chǎn)物實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ)，加入lacIq基因更嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目刂?/span>Lac啟動(dòng)子的開(kāi)啟，從而極大的降低了藍(lán)白斑篩選中的假陽(yáng)性率。此外，K1克隆感受態(tài)細(xì)胞中endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取，且質(zhì)粒得率要高于其他常用克隆菌株。本菌株具有T1噬菌體抗性（fhuA2）,同時(shí)，還具有一定的CCDB抗性，不適合CDDB相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
基因型為：F' proA+B+ lacIq ΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10)TetS endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1、轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1X109
2、質(zhì)粒提取得率比DH5a高20%
3、6小時(shí)見(jiàn)斑
4、10分鐘完成感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化(氨芐抗性質(zhì)粒)
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：
1.K1和DH5α轉(zhuǎn)化連接產(chǎn)物對(duì)比：
分別使用K1和DH5α進(jìn)行連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化，在6h左右，K1可見(jiàn)斑，7小時(shí)后可挑單克隆進(jìn)行菌落pcr。
對(duì)比圖如下：
2.K1和DH5α提質(zhì)粒對(duì)比
跑膠結(jié)果如下：
挑取單斑下提取質(zhì)粒圖：1-6分別為7h的DH5α，7h的K1，8h的DH5α，8h的K1，過(guò)夜的含氨芐抗性質(zhì)粒的DH5α，K1。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
單克隆菌落搖菌時(shí)間 | K1 Od600 | 質(zhì)粒濃度ng/μl | DH5α Od600 | 質(zhì)粒濃度ng/μl |
7h | 4.8 | 314.1 | 4.28 | 282.6 |
8h | 5.4 | 356.5 | 4.8 | 290.0 |
過(guò)夜 | 5.58 | 559.3 | 4.94 | 464.3 |
感受態(tài)快轉(zhuǎn)方法：
10min 快速轉(zhuǎn)化方案(適用范圍:氨芐抗性質(zhì)粒)
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中(解凍1-2分鐘)，加入目的DNA(質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物)，輕輕混勻，在冰浴中放置5分鐘。
2.將離心管置于42℃水浴中放置60秒，然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2-3分鐘，該過(guò)程不要搖動(dòng)離心管。
3.吸取全部感受態(tài)細(xì)胞加到含Amp抗生素的 LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，將感受態(tài)均勻涂開(kāi)。
4.倒置平板，37°C培養(yǎng) 12-16小時(shí)。
