■ 產(chǎn)品介紹
XL10-Gold菌株所制備的感受態(tài)細(xì)胞是目前轉(zhuǎn)化效率最高的感受態(tài)細(xì)胞，由Stratagene開發(fā)的特異性用于大質(zhì)粒或珍貴連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化或構(gòu)建文庫的超級(jí)感受態(tài)細(xì)胞。XL10-Gold菌株為Hte(high transformation efficiency)基因型，Hte是Stratagene開發(fā)的特異性提高感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率及大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化能力的宿主菌基因型，已成功應(yīng)用于40kd質(zhì)粒的構(gòu)建。[Δ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173]賦予XL10-Gold缺失幾乎所有已知的限制酶切系統(tǒng)；同時(shí)缺失核酸內(nèi)切酶(endA)，提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量；重組酶缺陷型(recA)減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA的穩(wěn)定性；Tetr，CamR賦予菌株四環(huán)素和氯霉素抗性；lacIqZΔM15的存在使XL10-Gold可用于藍(lán)、白斑篩選。對(duì)XL10-Gold使用LB，在37℃有氧的環(huán)境下培養(yǎng)，然后使用20%的甘油保藏菌種，42℃熱激處理可將質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)入XL10-Gold中。 |
基因型： | TetrD (mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F’proAB lacIqZDM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]a |
■ 基本信息
抗性: | 氯霉素（Chl） / 四環(huán)素（Tet） |
培養(yǎng)基: | LB |
菌株類別: | 大腸桿菌 |
培養(yǎng)條件: | 37℃，有氧，LB |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化: | 42℃熱激 |
保存方式: | 15%甘油，-80℃ |
基本應(yīng)用: | 用于基因克隆 |
■ 使用方法
建議超凈臺(tái)內(nèi)劃線涂板，得到單克隆后再進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)操作，避免雜菌污染。
■ 注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗(yàn)室研究，不能用于動(dòng)物，人體以及作為食品添加劑等用途。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3. 使用甘油菌時(shí)可不完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固體瓊脂平板即可，也可完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，菌株的活力會(huì)逐漸下降。
