產(chǎn)品簡介:
GS115 是畢赤酵母菌株,屬于真核細(xì)胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無效的,因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母培養(yǎng)菌株污染,往往會在培養(yǎng)基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素,來抑制細(xì)菌的污染和生長。GS115 畢赤酵母自身表型為 Mut+,但是 GS115 轉(zhuǎn)化株既能夠產(chǎn)生出 Mut+菌株,也能夠產(chǎn)生出 Muts 菌株。目的蛋白在這兩種轉(zhuǎn)化株的表達(dá)水平可能是不同的,并且具有不可預(yù)測性,所以只有通過實(shí)驗(yàn)才能得到最好的酵母表達(dá)方案。
畢赤酵母適宜的生長溫度是28℃至30℃,溫度超過32℃對蛋白的表達(dá)是有害的,并可能導(dǎo)致細(xì)胞的死亡。GS115畢赤酵母是組氨酸缺陷型(His4 基因型),如果表達(dá)載體上攜帶有組氨酸基因,可補(bǔ)償宿主菌的組氨酸缺陷,因此可以在不含組氨酸的培養(yǎng)基上篩選轉(zhuǎn)化子。這些受體菌自發(fā)突變?yōu)榻M氨酸野生型的概率一般低于 10-8。GS115 畢赤酵母可以在 YPD 培養(yǎng)基中生長,或者在補(bǔ)充有組氨酸的 minimal media中生長,但是無法在單獨(dú)的minimal media培養(yǎng)基中生長。質(zhì)粒轉(zhuǎn)化畢赤酵母GS115的菌株的方法有很多,如電轉(zhuǎn)化、化學(xué)轉(zhuǎn)化等。根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法的不同,用的試劑和培養(yǎng)基有所不同。
基因型為:His4;表型:Mut+