產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
PicoGreen與DNA雙鏈結(jié)合后才發(fā)出熒光,無(wú)DNA不發(fā)熒光;所發(fā)熒光與DNA濃度成正比。常規(guī)的DNA含量的檢測(cè)方法是在260nm(A260)處測(cè)其吸光值,主要缺點(diǎn)是核苷酸、單鏈核酸和蛋白質(zhì)對(duì)信號(hào)的影響很大,還會(huì)受到核酸制備過程中污染物的干擾,無(wú)法區(qū)分DNA和RNA,且不靈敏(5μg/mLdsDNA溶液A260=0.1)。PicoGreen定量檢測(cè)方法簡(jiǎn)單、方便,被多家生物制品廠選擇,成為生物制品殘留DNA檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)。
在2010年《中國(guó)藥典》中提出,PicoGreen定量DNA的方法檢出限約0.3ng/ml,DNA含量在1.25-80ng/mL范圍時(shí)線性較好(R2>0.99).
1)該方法可以測(cè)定來(lái)源于任何表達(dá)宿主樣品中的雙鏈DNA。
2)可以直接定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物而無(wú)需從反應(yīng)混合物中純化DNA。
3)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出傳統(tǒng)紫外A260的檢測(cè)方法和Hoechst33258的靈敏度。
4)較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖對(duì)測(cè)定無(wú)影響。
5)在等摩爾濃度 ssDNA 和 RNA 存在的條件下測(cè)定 dsDNA,影響很小。